پروٽين کي Ksantoproteinovaya رد: جي آيتن کي ۽ فارمولا لاڳاپا وڌائڻ

امان جي ڪيترن ئي پروٽين کي ksantoproteinovaya رد عمل استعمال ھيون جي معياري انشا قائم ڪرڻ ۾. گڏيو ۾ عطري امينا تيزابي جي موجودگي هڪ مثبت امتحان ٺهيل رنگ ۾ تبديل ٿيندو.

پروٽين ڇا آهي

اهو به هڪ پروٽين، جنهن جي ڪينجهر جسم لاء هڪ عمارت مواد آهي سڏيو ويندو آهي. پروٽين سياسي سائيز برقرار رکڻ، مختلف چڏي جي زخمي ۽ مئل بافتو جوڙجڪ بحال، ان وار، جلد ۽ ligaments ٿي. انهن جي شموليت سان، ڳاڙهي رت corpuscles ڄمائيندي، ڪيترن ئي hormones ۽ مدافعتي نظام خانا جي عام آپريشن تحت سنڀاليو ويندو.

هيء هڪ پيچيده آنو هڪ polypeptide 6 ~ 10 ³ daltons کان وڏو هڪ عام زندگي گذاري آهي ته آهي. پروٽين جي جوڙجڪ coupled peptide بانڊ جي هڪ وڏي انگ ۾ امينا امل residues نظر ايندا.

پروٽين جي جوڙجڪ

گهٽ molecular وزن peptides سان مقابلي ۾ انهن پدارٿن جي امتيازي خاصيت آهي ته اهي هڪ ٽي-dimensional spatial جوڙجڪ، ڪشش جي درجن ۾ طرحين طرحين سان معاونت اثرات ترقي يافته آهي. پروٽين چئن جوڙجڪ رکان. انهن مان هر هڪ لاء پنهنجي ڪنڀار ڪئي.

مان انو نڪتل امينا امل تسلسل جي بنيادي جوڙجڪ، اڏاوت جنهن جي پروٽين لاء ksantoproteinovaya رد عمل کي تسليم جي بنياد جي حيثيت. هن اڏاوت جو هڪ وقت ڪڍيل peptide بانڊ -HN-چوڌري-آپريٽو آهي، هڪ نلين حصو radicals امينا تيزابي ۾ پاسي زنجير آهن. اهي هڪ سڄي طور مال جي وڌيڪ مال وصف.

پرائمري پروٽين جي جوڙجڪ ڪافي مضبوط سمجهيو ويندو آهي، هن peptide ھٿيار ۾ مضبوط covalent ڳالهائڻ جي موجودگي جي ڪري آهي. پوء ليول جي ٺهڻ جي جزن جي ابتدائي مرحلي ۾ سيٽ تي منحصر ڪري وٺندي آهي.

هن ثانوي ڍانچي جي ٺهڻ کان هڪ کي گهاڻي ۾ امينا امل تسلسل، جنهن ۾ هائيڊروجن ھٿيار جي ڦيرائيندا جي وچ ۾ قائم آهن جو twisting جي ڪري ئي ممڪن آهي.

انو جي Tertiary سطح تي تنظيم انھن جي وچ ۾ سڀ ممڪن ڪنيڪشن جي ايندڙ سان ٻيا ذرا تي هڪ کي گهاڻي جي هڪ جهڙي، هائيڊروجن، disulfide، covalent يا ionic مرڪب سان جي ٺهيل آهي. جنهن جي نتيجي ۾ globules جي صورت ۾ انجمن آهي.

انھن جي وچ ۾ ڪيميائي ھٿيار جي ٺهڻ سان Tertiary اڏاوتن جي spatial بندوبست جي آنو يا quaternary ليول جي آخري فارم جي ٺهڻ تائين ٿي ويا آهن.

امينا تيزابي

اهي پروٽين جي ڪيميائي مال جو ڪارڻ. نه جي باري ۾ 20 اهم امينا مختلف تسلسل ۾ polypeptides اپ ٺاهڻ تيزابي آهن. هيء به صورت hydroxyproline ۽ hydroxylysine بنيادي peptide نڪتل ۾ نادر aminocarboxylic امل جو حوالو ڏنو آهي.

اعتراف ksantoproteinovaya پروٽين رد عمل جي نشاني جي طور تي، ڪجهه امينا تيزابي جي موجودگي سندن انشا ۾ مخصوص اڏاوتن جي موجودگي suggesting، reagents جي رنگ جي تبديلي روزي ڏيندو آھي.

جيئن ته ان کي ڪڍي موٽيو، اھي carboxylic تيزابي ته امينا گروپ تي هائيڊروجن جوهر جي راء پيا آهن.

جي آنو جو هڪ مثال ڍانچي جي خدمت ڪري سگهون ٿا هڪ بنيادي ڍانچي فارمولا جي simplest امينا امل طور glycine (HNH- HCH- COOH).

هن معاملي ۾ hydrogens چوڌري ₂ جي هڪ - هڪ ڪاربان گهڻي بنيادي هڪ benzene رنگ، امينا، sulfo، carboxy قسمن سان متبادل ٿي سگهي ٿو.

ksantoproteinovaya رد عمل ڇا ٿو

مختلف طريقن سان استعمال ڪري پروٽين جي معياري ڇنڊڇاڻ لاء. اهي ردعمل ۾ شامل آهي:

• violet رنگ جي ظاهر سان biuret؛
• هڪ نيري-violet حل لاء فارم ninhydrin؛
• هڪ ڳاڙهي رنگ جي قيام سان formaldehyde؛
• Nogier جي ڀورو-ڪارو رنگ precipitate ڪرڻ.

هر طريقو ڪڍي کڻي ۾ پروٽين جي موجودگي ۽ سندن آنو ۾ ڪجهه فعلي گروپن جي موجودگي ثابت.

جي پروٽين کي رد نه ksantoproteinovaya. اهو به breakdown Mulder سڏيو ويندو آهي. اهو پروٽين، جنهن ۾ عطري ۽ heterocyclic امينا تيزابي نه آھن لاء رنگ ردعمل کي وهم.

اهڙي نموني عمل جي هڪ خصوصيت nitration آهي امل nitric خاص ۾ cyclic امينا امل residues جي benzene رنگ جي nitro گروپ جي راڄگديء.

هن عمل جي نتيجي ۾ nitro مرڪب، جنهن precipitated جي ٺهڻ آهي. هن جي بنيادي خاصيت ksantoproteinovaya رد عمل آهي.

ڇا جي امينا امل آڌار

نه سڀ aminocarboxylic امل اهڙي نموني استعمال ڪرڻ لڌا ڪري سگهجي ٿو. جي آنو امينا تيزابي ۾ benzene منڊي يا heterocyclic رنگ جي موجودگي - ksantoproteinovaya پروٽين نظربند رد عمل جو مکيه مضمون.

ڇو ته پروٽين aminocarboxylic تيزابي ٻه عطري، جنهن ۾ هڪ phenyl گروپ (phenylalanine لاء) نه آھي، ۽ هڪ hydroxyphenyl بنيادي (tyrosine ۾) مان اڪيلائيء آهي.

ksantoproteinovaya رد عمل سان آڌار heterocyclic امينا امل tryptophan، indole هڪ عطري نيوڪلئس ۾ گذارڻ آهي. جي پروٽين ۾ مٿي مرڪب جي موجودگي جو امتحان ماحول جي خصلت رنگ تبديل ڪري ڏئي ٿو.

ڇا استعمال reagents

سنڌ جي رد عمل کان ٻاهر کڻي لاء آنا پروٽين، يا سبزي اصليت جو هڪ 1٪ حل تيار ڪرڻ جي ضرورت آهي ksantoproteinovaya.

عام طور تي آنا، جنهن جي زردي کان پروٽين جي وڌيڪ جدائي لاء جدا آهي ھوا. پروٽين جو هڪ 1٪ حل لاء پاڪ پاڻي جي هڪ tenfold مقدار ۾ جلي ويو. جي نتيجي ۾ پروٽين سيال جي ٽوڙڻ واري عمل کان پوء cheesecloth جي ڪيترن ئي ۾ وڇوٽين جي ذريعي ڪڍيا ڪيو وڃي. هن جو حل هڪ مين جاء تي جمع ٿي وڃي.

اهو هڪ سبزي پروٽين سان رد ڪيون ڪرڻ ممڪن آهي. حل تيار ڪرڻ 0،04 ڪلو جي هڪ مقدار ۾ ڪڻڪ جو اٽو استعمال ڪيو ويندو آهي. پاڪ پاڻي جي 0،16 آيل. هن ingredients هڪ کپي جنهن جي باري ۾ + 1 ° سي جي گرمي پد تي هڪ عمده جاء ۾ 24 ڪلاڪن لاء ٻڌل آهي ۾ ملايو هئا هن ڏينهن جي آخر ۾ سنڌ جي حل اڀامي ويو، روئي روئي ۽ پوء کڻي پهرين منجھانئس فلٽريشن پلانٽ جي پٺيان - هڪ پيپر ويڙھيل فلٽر. سنڌ جي نتيجي ۾ سيال جو هڪ مين جاء ۾ رکيو ويو. هيء حل جي albumin تعريف ۾ اهڙا موجود آهي.

مکيه nitric امل conc استعمال reagent طور رد عمل ksantoproteinovaya ٻاهر کڻي لاء. وڌيڪ reagents 10٪ sodium hydroxide يا نوشادر، جي gelatin حل ۽ unconcentrated phenol جو حل آهي.

هن جو طريقو

هڪ صاف ٽيوب ۾ 2 ml جي رقم ۾ ڍڪيل يا اٽو -th 1٪ پروٽين حل ڪيو آهي. هن کي flocculation کي ضلعا nitric امل جي باري ۾ 9 ڦڙا شامل آهي رک. سنڌ جي نتيجي ۾ آميزش پيلو precipitate جتان غائب ۽ ان جو رنگ حل ۾ چوڻي نتيجي ۾ وتندو هو.

جڏهن ته سيال جي ڀت گڏ ٽيوب ۾ نازل cools جي باري ۾ 9 ڦڙا شامل sodium hydroxide، ، ضلعا جنهن جي عمل لاء ڀؤ آھي. سنڌ جي رد عمل وچولي کنری ٿيندو. مواد جي پرک ٽيوب ۾ نارنگي رنگ ٿيندو.

جي خاصيتون

تنهنڪري ksantoproteinovaya جي پروٽين جي عمل جي nitric امل کي معياري رد عمل سڏيو، جي ٺهيل شامل هيٺ پرفارم ڪيو آهي fume ويجها. جڏهن ضلعا caustic پدارٿن سان ڪم سڀني جي حفاظت ساڻ مشاهدو.

جي ٽيوب کان موڪليل جي ڇڏڻ جي گرمائش عمل ته جنھن مھل ان کي هڪ رکندڙ ۾ تيار ڪرڻي ۽ ميلان منتخب سمجهيو وڃي هجڻ ضروري آهي دوران نمودار ٿي سگھي ٿو.

ضلعا nitric امل ۽ caustic سوڍا جي Dialing رڳو وات جي هڪ گلاس pipette ۽ pears رٻڙ ممنوع pipette استعمال ڪرڻ گهرجي.

phenol سان مائٽ رد

وضاحت لاء، عمل ۽ phenyl گروپن جي موجودگي جي تصديق هڪ اهڙي نموني hydroxybenzene سان پيروڪار آهي.

جڏهن ته ٽيوب جلي phenol جي 2 mL بڻائي ٿي، پوء جتان جي ڀت گڏ، ضلعا nitric امل جي 2 ml شامل ڪيو ويو. حل گرمائش کي تابع ڪيو ويو، انھي ان کي پيلو ٿيندو. هن رد عمل جي benzene رنگ جي موجودگي جي معيار آهي.

عمل hydroxybenzene nitric ص-nitrophenol ۽ 15 35 تائين جي هڪ في سيڪڙو ۾ اي-nitrophenol جي آميزش جي ٺهڻ جي پٺيان امل سان nitrated.

gelatin سان مقابلو امتحان

جي پروٽين لاء ته ksantoproteinovaya رد عمل عطري جوڙجڪ سان هڪ امينا امل کي روشن ڪري ثابت ڪرڻ جي، پروٽين آهي ته هڪ phenolic گروپ نه ٿا استعمال ڪري.

هڪ صاف ٽيوب ۾ 2 ml جي رقم ۾ 1٪ gelatin حل ڪيو آهي. هن کي ضلعا nitric امل جي باري ۾ 9 ڦڙا شامل ڪيو ويو آهي. سنڌ جي نتيجي ۾ آميزش وتندو آهي. حل پيلو ۾ رنگ نه هو، جنهن جو هڪ عطري جوڙجڪ سان امينا تيزابي جي غير موجودگيء پٽڻ. ڪڏهن ڪڏهن اهڙا پروٽين ۽پليديء جي موجودگي جي ڪري ماحول جي هڪ معمولي yellowing آهي.

ڪيميائي equations

ٻه قدم رد عمل ۾ ksantoproteinovaya پروٽين هلندو هو. فارمولا پهرين مرحلي nitration عمل ضلعا nitric امل استعمال ڪري امينا امل انو بيان ڪري ٿو.

هڪ مثال جي tyrosine ڪرڻ جي nitro گروپ جي منسلڪ nitrotyrosine ۽ dinitrotirozina بڻجي ڪرڻ آهي. ۾ benzene رنگ جي پهرين صورت مان ڪا ₂ -radical انسيت آهي، ۽ ٻيو مرڪب ٻه هائيڊروجن atoms ڪا ₂ سان متبادل _آهن. ڪيميائي فارمولو ksantoproteinovaya tyrosine رد عمل nitric امل nitrotyrosine آنو بڻجي ڪرڻ سان رد عمل سان ظاھر ڪئي.

Nitration عمل پيلو ڍنگ ۾ عبوري colorless coloring سان گڏ آهي. جي امينا امل هجن پروٽين سان هن رد عمل ٻاهر کڻي ۾ phenylalanine يا tryptophan، ۽ ان جو حل تبديلين جي رنگ residues.

ٻيو قدم ammonium يا sodium hydroxide سان، tyrosine انو جي nitration جي رد عمل پيداوار آهي، خاص طور تي nitrotyrosine. جنهن جي نتيجي ۾ هڪ sodium يا ammonium لوڻ جنهن ۾ پيلو-نارنگي رنگ آهي. اهڙي رد عمل nitrotyrosine انو جي امڪان سان لاڳاپيل آهي ته quinoid روپ ۾ وڃڻ. تنهن کان پوء nitronic امل، جنهن conjugated ڪنڀر ھٿيار جي هڪ quinone نظام ڪئي منجھانئس ٺاهي کاري.

اهڙيء طرح پروٽين کي ksantoproteinovaya رد ڪري ڇڏيندي. هن لاڳاپا وڌائڻ ٻيو قدم مٿي پيش ڪيو.

نتيجا

جي ٽي وارين ۾ شامل fluids جي ڇنڊڇاڻ دوران، سنڌ جي حوالي حل phenol سان ملي جلي وئي آهي. هڪ benzene رنگ سان پدارٿن nitric امل سان معياري رد عمل ڏي. نتيجي طور، ان جي حل جي رنگ ۾ تبديليون.

طور سڃاتو وڃي ٿو، gelatin collagen جي هڪ hydrolyzed روپ هئا. هن پروٽين جي امينا تيزابي جي عطري ڍانچي تي مشتمل نه رکندو آھي. هڪ امل سان رد ڪندي سنڌ جي وچولي جي رنگ ۾ ڪا به تبديلي.

ٽين ٽيسٽ ٽيوب ۾ پروٽين ksantoproteinovaya کي هڪ مثبت رد عمل آهي. ٿڪل جي پٺيان طور ٺھيل سگهي ٿو ڪري سگهجي: عطري جوڙجڪ سان سڀ پروٽين، ڇا ان کي هڪ phenyl گروپ يا هڪ indole منڊي ٿي، جي حل جي رنگ ۾ تبديلي ڏنو. هيء هڪ پيلي رنگ سان nitro مرڪب جي ٺهڻ جو سبب آهي.

هڪ رنگ رد عمل ٻاهر کڻي امينا تيزابي ۽ پروٽين ۾ مختلف ڪيميائي جوڙجڪ جي موجودگي پٽڻ. مثال طور gelatin ڏيکاري ٿو ته ان جي انشا aminocarboxylic امل شامل هڪ phenyl گروپ يا هڪ cyclic جوڙجڪ پوڻ تي نه.

جڏهن ان کي هڪ مضبوط nitric امل لاڳو ksantoproteinovaya رد عمل سان جلد جي yellowing جي بيان ڪري سگهجي ٿو. اهو ساڳيو رنگ سندس اهڙي ڇنڊڇاڻ دوران frothy کير بڻجي ويندو.

clinical ليبارٽري ۾ عملي طور هن جو رنگ نموني جي پيشاب ۾ پروٽين جي ڳولا لاء استعمال نه آهي. هن جو پيشاب پاڻ جي پيلي رنگ جي ڪري آهي.

Ksantoproteinovaya رد عمل مختلف پروٽين جو حصو، جيئن tryptophan ۽ tyrosine طور امينا تيزابي جي quantification لاء increasingly شده ٿيو.